1 技术简介
真菌属于较低等的真核生物,种类繁多,在自然界中分布广泛。据估计,全世界约有150万种真菌,其中包含许多具有重要药用价值和食用价值的有益真菌,同时也存在着大量能引发动植物病害的致病菌。因此,合理利用有益真菌,控制和预防有害真菌对人类的生产和生活具有重要的意义。而真菌基因组的阐明,将为真菌特性的分析提供重要依据。随着高通量测序技术的成熟,基因组测序成本已大大降低,使得快速而经济的进行真菌基因组测序成为可能,目前真菌基因组学研究已经进入了一个快速增长时期。目前通过Illumina和Pacbio/ONT平台测序并进行de novo基因组组装,即可获得获得真菌的基因组完成图,基于HIC辅助组装,可以得到真菌的基因组精细图,并进行深度生物信息挖掘。
2 实验流程
3 样本准备
样本类型 | 总量 | 浓度 | OD | 完整性(胶图) | 纯度 |
基因组DNA-Pacbio平台 | 3.5 μg | 80 ng/μl | OD260/280: 1.6-2.2 | 无降解或轻微降解(主峰在40K附近且弥散不低于20Kb) | 无蛋白,RNA/盐离子等污染,样本无色透明不粘稠 |
OD260/230: 1.6-2.5 | |||||
基因组DNA-Nanopore平台 | 1 μg | 45 ng/μl | OD260/280: 1.8-2.2 | 无降解或轻微降解,基因组主峰在30K附近或以上,且弥散不低于20K | 无蛋白,RNA/盐离子等污染,样本无色透明、不黏稠 |
OD260/230: 1.8-2.2 |
4 生信分析流程
5 分析结果展示(部分)
碳水化合物酶和木质素降解酶基因拷贝数热图